前天提到EnochianBiosciences公司的HijackRNA用于慢乙肝的临床试验获得了FDA的积极反馈，而这都是基于该公司此前在嵌合体小鼠上的试验取得令人振奋结果之上的，今天我们就来看看这小老鼠结果有多震撼！尽管进行了有效的治疗和接种，但乙型肝炎病毒(HBV)感染仍然是导致全球慢性肝病和约90万人死亡的主要原因。
目前专注于减少HBV(CCC)DNA或阻断病毒复制的策略并不成功。据此研究人员推测，通过劫持HBVpol诱导HBV感染的肝细胞凋亡或可以有效地根除感染。在肝脏特异性甲状腺素结合球蛋白(TBG)启动子下表达非功能性、非编码(nc)RNA(HBVHijackRNA)的独特专有载体构建体被包装在AAV8颗粒中。HBVHijackRNA是使用人caspase-9(CASP-9)cDNA负链和位于两侧的2个HBVepsilon信号(HBVpol特异性识别序列)组成。
1、细胞转染时遭遇细胞污染怎么办腺相关病毒(AAV)是一种人细小病毒，目前因为能作为一种基因治疗载体而受到广泛关注。构建重组AAV(rAAV)涉及到用一个目的基因替换病毒基因组的大部分，然后将这个重组基因组包装到一个有感染性的病毒颗粒里。目前大多数生成rAAV的实验方案需要共转染一个载体质粒和一个表达病毒复制和结构基因的包装质粒到腺病毒(Ad)感染的培养细胞中。
在此我们描述了新的辅助质粒(pH3和pH5)，排除了Ad共转染的需求。辅助质粒表达AAV的rep和cap基因和AdE2A、VAI和E4基因，当辅助质粒在没有Ad感染的情况下共转染到人293细胞中，rAAV载体产量超过了pAAV/Ad包装质粒的80倍。另外，有复制能力的AAV在rAAV制备过程中少于0.00125%，此系统的主要优点是(1)无需感染性的腺病毒(2)只使用两个质粒就提高了转染效率和载体的产出。